Việc phát triển các phương pháp đáng tin cậy và tiêu chuẩn hóa để kiểm tra khả năng mẫn cảm của đàn muỗi đối với thuốc trừ sâu là rất quan trọng để hiểu được hiệu quả của các hoạt chất hoặc công thức mới. Các phương pháp kiểm tra khả năng mẫn cảm của đàn muỗi đối với thuốc trừ sâu hoặc sản phẩm tiếp xúc (như những sản phẩm được quảng bá trong các chương trình y tế công cộng) đã được thiết lập và tiêu chuẩn hóa. Tuy nhiên, các phương pháp kiểm tra thuốc trừ sâu dạng bay hơi hoặc dạng khí dung được sử dụng trong các sản phẩm gia dụng rất khó thực hiện hiệu quả. Dựa trên các khuyến nghị của Tổ chức Y tế Thế giới về thuốc trừ sâu gia dụng, chúng tôi đã phát triển một phương pháp tiêu chuẩn hóa và có năng suất cao để kiểm tra các sản phẩm dạng khí dung bằng cách sử dụng muỗi nhốt trong lồng và một phương pháp khử trùng hiệu quả được thực hiện trong buồng thử nghiệm Peet-Grady (buồng thử nghiệm PG). Chúng tôi đã xác nhận hiệu quả của phương pháp mới này bằng cách sử dụng quần thể muỗi Aedes và Anopheles kháng và mẫn cảm với thuốc trừ sâu. Một đặc điểm mới của phương pháp này là việc bao gồm một buồng hướng vào lồng muỗi, cho phép đánh giá định lượng theo thời gian thực tỷ lệ tiêu diệt muỗi sau khi tiếp xúc với thuốc trừ sâu. Khử trùng bằng tăm bông loại bỏ hiệu quả dầu khí dung chứa pyrethroid còn sót lại trên bề mặt buồng thử nghiệm, với tỷ lệ tử vong dưới 2% đối với muỗi mẫn cảm được thử nghiệm trực tiếp trên bề mặt buồng. Không quan sát thấy sự không đồng nhất về tỷ lệ tiêu diệt hoặc tử vong giữa các muỗi bị nhốt trong buồng PG. Phương pháp lồng kép của chúng tôi cung cấp năng suất cao gấp tám lần so với phương pháp bay tự do, cho phép thử nghiệm đồng thời các chủng muỗi khác nhau và phân biệt hiệu quả giữa quần thể muỗi nhạy cảm và kháng thuốc được thử nghiệm song song.
Cho đến nay, thuốc trừ sâu dạng xịt chủ yếu được sử dụng trong gia đình để bảo vệ cá nhân, và chỉ được sử dụng hạn chế trong các chương trình y tế công cộng. Tuy nhiên, các nghiên cứu gần đây đã cho thấy việc sử dụng thuốc trừ sâu trong gia đình rất phổ biến ở những khu vực có nhiều bệnh do côn trùng truyền. Cho dù mục đích là để đuổi muỗi hay phòng ngừa bệnh tật, thì vẫn cần thiết phải có các phương pháp chuẩn hóa và dễ sử dụng để sàng lọc quần thể muỗi bản địa về khả năng kháng thuốc trừ sâu trong gia đình. Điều này rất quan trọng để dự đoán hiệu quả của thuốc trừ sâu đối với các vật chủ truyền bệnh tại địa phương và hiểu được việc sử dụng thuốc trừ sâu trong gia đình ảnh hưởng như thế nào đến quá trình chọn lọc tiến hóa dẫn đến kháng thuốc trừ sâu.
Phương pháp bổ sung 1 cung cấp hướng dẫn chi tiết từng bước để thực hiện chương trình thử nghiệm thuốc trừ sâu dạng khí dung của chúng tôi.
Mặc dù hướng dẫn của WHO khuyến nghị sử dụng máy phun khí dung tự động, nhưng chúng không đưa ra các thông số kỹ thuật cụ thể. Việc sử dụng máy phun khí dung tự động là rất quan trọng, vì phun khí dung thủ công trong buồng propylene glycol không chỉ tốn nhiều công sức mà còn có thể gây ra sự không nhất quán về vị trí và sự thay đổi về thời gian phun khí dung.
Buồng phản ứng phải được khử trùng sau mỗi lần thử nghiệm, nhưng phương pháp làm sạch bên trong được khuyến nghị trong Hướng dẫn của WHO là sử dụng nước từ vòi. Trong công việc hàng ngày của chúng tôi, phương pháp này là bước tốn nhiều công sức nhất trong việc vận hành thiết bị phân tích sinh học, vì vậy chúng tôi đã phát triển và thử nghiệm quy trình khử trùng bằng tăm bông.
Các bộ phận có thể tháo rời của quạt được xử lý như mô tả ở trên, còn cánh quạt và khung quạt được làm sạch bằng miếng bọt biển thấm dung dịch Decon 90 5%.
Dựa trên mối quan hệ giữa thời gian phun và tốc độ phân phối sản phẩm, thiết bị phun khí dung của chúng tôi cũng cho thấy độ chính xác tốt trong việc kiểm soát tỷ lệ liều lượng khí dung, ít nhất là trong phạm vi thử nghiệm từ 1 đến 4 lần. Như thể hiện trong Hình 3b, đặc điểm này đặc biệt quan trọng để mô tả mối quan hệ liều lượng - phản ứng của các công thức khí dung mới hoặc xác định liều lượng nhận dạng để phát hiện khả năng kháng thuốc trừ sâu.
Chúng tôi chứng minh rằng quy trình đánh giá thuốc trừ sâu dạng xịt gia dụng được sửa đổi của chúng tôi, sử dụng phương pháp khử trùng bằng tăm bông, lồng kép, máy phun điều khiển từ xa và ghi dữ liệu sinh trắc học từ camera hành động, là một giải pháp thay thế hiệu quả và khả thi hơn so với các phương pháp hiện hành.AICác khuyến nghị. Phương pháp khử trùng bằng tăm bông, chỉ cần 20 phút, tiết kiệm đáng kể thời gian so với quy trình hiện hành (thường cần một giờ cho mỗi buồng thử nghiệm). Nó cũng giảm thời gian người vận hành phải mặc đầy đủ thiết bị bảo hộ cá nhân (ví dụ: mũ bảo hiểm hô hấp và quần áo chống tĩnh điện). Hơn nữa, phương pháp này tạo ra ít chất lỏng và quần áo bị nhiễm bẩn hơn so với việc làm sạch hoàn toàn buồng thử nghiệm, do đó giảm thiểu khả năng nhiễm bẩn phòng chứa buồng thử nghiệm. Phương pháp khử trùng bằng tăm bông cũng thích hợp để khử trùng các phòng thử nghiệm bán cố định cần thiết.tối thiểuCách bố trí nội thất trong nhiều kiểu bố cục phòng khác nhau.
Một vấn đề quan trọng được nghiên cứu trong công trình này và các nghiên cứu khác là việc chuẩn hóa liều lượng phơi nhiễm thuốc trừ sâu được sử dụng trong môi trường giữa các quy trình thử nghiệm khác nhau. Như thể hiện trong Hình 2b, mặc dù thời gian phun cố định, thể tích phun lại khác nhau giữa các loại bình xịt, có thể phản ánh sự khác biệt trong quy trình sản xuất (ví dụ: áp suất bên trong, chất đẩy sử dụng, cấu trúc vòi phun, v.v.). Hơn nữa, việc thiếu các thiết bị phun từ xa có sẵn trên thị trường với sự linh hoạt cần thiết về thời gian phun đã hạn chế việc sử dụng chúng trong việc đánh giá mối quan hệ liều lượng - phản ứng để kiểm soát muỗi. Việc phun thủ công qua các cửa thử nghiệm hoặc cửa tiếp cận (nếu có) có thể dẫn đến sự biến đổi về liều lượng phơi nhiễm. Trên thực tế, kết quả của chúng tôi nhấn mạnh sự cần thiết và tầm quan trọng của việc giảm thiểu các nguồn biến đổi này. Đối với quần thể muỗi Aedes aegypti kháng thuốc, chúng tôi quan sát thấy mối tương quan giữa liều lượng khí dung và kết quả xác định cuối cùng về tính nhạy cảm hoặc kháng thuốc (Hình 3b). Lý tưởng nhất là liều lượng khí dung nên được chuẩn hóa theo gam chất khí dung hơn là theo thời gian khí dung để tạo điều kiện thuận lợi cho việc so sánh giữa các nghiên cứu khác nhau.
RCAD cung cấp một phương pháp tiếp cận thay thế cho nghiên cứu trong tương lai nhằm giảm thiểu tác động của các biến thể quy trình. Mặc dù chúng tôi nhận thấy việc chuẩn hóa các bình xịt khí dung là không khả thi, nhưng chúng tôi đã chứng minh rằng khối lượng khí dung được phân phối thông qua các bình xịt khí dung khác nhau có thể được ước tính một cách đáng tin cậy bằng cách hiệu chuẩn chiều dài phun (Hình 2b, 3a). Việc chuẩn hóa nồng độ khí dung trong bất kỳ buồng thử nghiệm nào là rất quan trọng để cải thiện khả năng tái lập kết quả.
Dựa trên kinh nghiệm của chúng tôi và các nhóm nghiên cứu khác, các khuyến nghị trong Hướng dẫn hiện hành về việc sử dụng các phương pháp phát hiện khí dung để kiểm tra muỗi bay tự do đặt ra những thách thức đáng kể về mặt hậu cần đối với các nghiên cứu trong phòng thí nghiệm và bán thực địa. Ví dụ, các phương pháp phát hiện muỗi bay tự do có năng suất rất thấp (bao gồm cả việc bắt lại những con muỗi bay tự do còn sống sót rất tốn công sức) và gặp phải một số hạn chế kỹ thuật, chẳng hạn như khó khăn trong việc xác định tỷ lệ tiêu diệt trong thời gian thực.
Mặc dù thí nghiệm lồng đôi đã được kiểm chứng của chúng tôi giải quyết được vấn đề hạn chế luồng khí và là một phương pháp khả thi để sàng lọc khả năng mẫn cảm của muỗi với thuốc trừ sâu dạng khí dung, cần lưu ý rằng tỷ lệ tử vong của muỗi ở quần đảo Cayman thấp hơn đáng kể trong thí nghiệm lồng so với thí nghiệm bay tự do (Hình 5c, Bảng 1). Sự khác biệt này có thể phản ánh sự giảm liều lượng thuốc trừ sâu bên trong lồng, do ít giọt khí dung xuyên qua lưới và vào trong lồng hơn. Các nghiên cứu trong tương lai có thể sử dụng vải lưới lớn hơn và thiết kế lồng có tốc độ luồng khí của quạt cao hơn (ví dụ: thiết kế hình trụ) để xác thực thêm các kết quả thu được bằng các phương pháp thí nghiệm khác nhau.
Thời gian đăng bài: 02/02/2026